GB-T?18979-2003?食品中黃曲霉毒素的測定?免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了免疫親和層析凈化—高效液相色譜法和免疫親和層析凈化—熒光光度法測定食品中黃曲霉毒素的條件和詳細(xì)分析步驟
本標(biāo)準(zhǔn)適用于玉米、花生及其制品（花生醬、花生仁、花生米）、大米、小麥、植物油脂、醬油、食醋等食品中黃曲霉毒素的測定。
樣品中黃曲霉毒素的檢出限：免疫親和層析凈化—高效液相色譜法和免疫親和層析凈化—熒光光度法為1mg/kg；免疫親和層析凈化—熒光光度法測定醬油樣品中黃曲霉毒素檢出限為2.5mg/kg。
免疫親和層析凈化高效液相色譜法
方法提要
? ? ? ?試樣經(jīng)過甲醇-水提取，提取液經(jīng)過濾、稀釋后，濾液經(jīng)過含有黃曲霉毒素特異抗體的免疫親和層析凈化，此抗體對黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2具有專一性，黃曲霉毒素交聯(lián)在層析介質(zhì)中的抗體上。用水或吐溫/PBS將免疫親和柱上雜質(zhì)除去，以甲醇通過免疫親和層析柱洗脫，洗脫液通過帶熒光檢測器的高效液相色譜儀柱后碘溶液衍生測定黃曲霉毒素的含量。
儀器和設(shè)備
實驗室常規(guī)儀器、設(shè)備、材料及下列各項。
1?高速均質(zhì)器：18,000?r/min?~22,000?r/min。
2?黃曲霉毒素免疫親和柱。
3?玻璃纖維濾紙：直徑11cm，孔徑1.5μm。
4?玻璃注射器：10?mL，20mL。
5?玻璃試管：直徑12?mm?，長75mm，無熒光特性。
6?高效液相色譜儀：具有360nm激發(fā)波長和大于420nm發(fā)射波長的熒光檢測器。
7?空氣壓力泵。
8?微量注射器：100mL。
9?色譜柱：C18柱（柱長150?mm?，內(nèi)徑4.6mm，填料直徑5mm）。

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