改良大腸桿菌O157顯色培養(yǎng)基使用說明書

此培養(yǎng)基用于大腸桿菌O157的分離和鑒定。

一、組分

瓊脂              15.0g/L

蛋白胨、酵母粉    13.0g/L

色素              1.2g/L

添加劑 A          1瓶

添加劑 B          1瓶

pH                7.0±0.2

二、操作

1.       稱取瓶內干粉，用1000ml蒸餾水或純水溶解，可按29.2g/L的比例擴大或縮小。

2.       上述干粉緩慢倒入蒸餾水中，充分攪拌溶解。

3.       加熱至100℃,并按常規(guī)不斷攪拌。如果用高壓滅菌鍋，不要加壓，加熱不能超過100℃，混合物也可以在微波爐內加熱，使用微波爐加熱時，煮沸后立即移出微波爐并不斷攪拌，而后移入微波爐再加熱，直至完全溶解（大氣泡代替泡沫產生，大約需要2分鐘）。

4.       冷卻至45-50℃，待用。

5.       在添加劑A中加入1ml無菌水和在添加劑B中加入1ml95％乙醇，放置在37℃水浴加熱10分鐘，輕輕搖動待內容物全部溶解方可使用。然后以無菌手續(xù)分別加入到培養(yǎng)基中，輕輕混勻。（添加劑A和B各1ml，可用于1000ml培養(yǎng)基，可按比例放大或縮小，剩余的添加劑可以保存在－20℃冰箱中，有效期半年），然后把混勻的培養(yǎng)基傾入培養(yǎng)皿或試管。

三、貯存

1.添加劑A和B，4℃保存，有效期一年。

2.干粉保存在15-30℃環(huán)境下。傾注好的培養(yǎng)基在室溫可保存1天，4℃冰箱中可貯存兩星期。

四、結果

劃線接種（如果培養(yǎng)基剛從冰箱中取出，要恢復至室溫后才能使用），37℃培養(yǎng)24小時。

★  建議通過乳膠試驗驗證可疑菌落。