Alba-STED單分子級細胞定量分析系統(tǒng)Alba v5 STED FFS/FLIM是一款應用于實驗室內(nèi)定量生物學和材料科學研究,具有單分子級檢測精度激光掃描顯微成像系統(tǒng)。
Alba-STED FFS/FLIM測量:
· 1p 或者 2p 共焦成像
· FLIM熒光壽命成像(FastFLIM or TCSPC)
· PLIM磷光壽命成像
· 偏振光成像
· 熒光光譜波動分析 (FCS,F(xiàn)CCS,PCS,F(xiàn)LCS)
· RICS,N&B,Scanning FCS
· Burst Analysis
· FRET高效檢測
· 3D粒子軌跡跟蹤
· 20nm分辨率納米圖像重構
Alba-STED for FFS/FLIM主要特點:
· 具有獨立接口進行單光子和雙光子激發(fā)
· **4通道檢測
· 可擴展第五通道檢測器或CCD相機
· 使用計算機對各檢測通道進行單獨控制,能夠進行高精度FFS成像
· 快速掃描成像
· 具有偏振模塊
· 全自動化控制—濾光片切換盤、開關、通光光圈、激光強度和檢測通道
· 具有友善的軟件操作界面,通過VistaVision軟件系統(tǒng)可以得到FLIM/ FRET,RICS和FFS (FCS,PCH,scanning FCS,N&B)圖像。
激發(fā)模式:
· 單光子激發(fā)模式(激光二極管和超連續(xù)激光)
· 雙光子激發(fā)模式(Ti-藍寶石激光,光纖激光)
顯微鏡系統(tǒng):
Alba v5 STED FFS/FLIM 系統(tǒng)能夠耦合到絕大多數(shù)熒光顯微鏡和正置、倒置顯微鏡上。
探測器:
· 快速GaAs 探測器
· 混合光電倍增管探測器
· 雪崩光電二極管
Alba-STED for FFS/FLIM配置
儀器特點 |
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軟件系統(tǒng) |
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光源 |
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激光發(fā)射器 | · 3,4,6型激光二極管, 通過光纖傳到到顯微鏡中 |
顯微鏡 |
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物鏡 |
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雙色向濾光鏡 |
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偏振 | · 立方分光鏡,波長范圍:450-1100 nm,消減比率:10,000:1 +/- 3度 |
載物臺 |
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樣品夾持器 |
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光檢測器 |
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操作系統(tǒng) |
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電源 |
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尺寸 |
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重量 |
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Alba-STED for FFS/FLIM
FFS 測量 | · 熒光相關光譜 (單相關和交叉相關) · 光子計數(shù)統(tǒng)計 (PCH) · FFS 測試(XYZ平臺成像) · FLCS,熒光壽命相關光譜 · 掃描 FCS · 數(shù)值 & 亮度 (N&B) · 光柵成像相關光譜 (RICS) |
單點模式測試 | · 強度 · 偏振 · 動力學 · 壽命時間 |
成像模式測試(Single plan and z-stack) | · 強度 · 偏振 · 比率測量 · FLIM |
FLIM成像(數(shù)字頻域)(single plane and z-stack) | · 獲取數(shù)字頻域(DFD),同時獲取FLIM圖像和穩(wěn)態(tài)圖像 |
FLIM成像(時域)(single plane and z-stack) | · 時間相關單光子計數(shù)(TCSPC) |
超高分辨率 | · 粒子追蹤 · 納米成像 |
單分子測試 |
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Alba-STED for FFS/FLIM測試舉例
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使用FastFLIM技術對60nm熒光顆粒進行成像(共焦(綠色)vs. pSTED(紅色))
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使用FastFLIM技術對SiR標記的神經(jīng)肌動蛋白細胞進行成像(共焦(左邊)vs. pSTED(右邊)).
增加pSTED分辨能力,使用矢量畫圖
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60nm熒光顆粒共焦成像(左);pSTED 成像(中間);基于二進制處理的增強型pSTED 圖像(右)