在液相色譜儀分析中該如何處理流動(dòng)相?
液相色譜儀是色譜檢測法的一個(gè)重要分支,與氣相色譜儀相比,液相色譜儀主要用于高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物樣品的檢測分析。液相色譜儀是以液體為流動(dòng)相,貫穿在整個(gè)色譜流路系統(tǒng)中,對(duì)于流動(dòng)相的要求是除了不能與樣品發(fā)生反應(yīng)外,還應(yīng)該是純凈無雜質(zhì)的,常用的流動(dòng)相有甲醇、乙腈水溶液。
為了使檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確,在進(jìn)行液相色譜儀分析樣品之前,須對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行預(yù)處理。流動(dòng)相預(yù)處理方法主要分為兩步:過濾和脫氣。以甲醇作為流動(dòng)相為例,具體操作方法如下。
流動(dòng)相過濾的目的是去除甲醇溶液中的雜質(zhì)。由于液相色譜儀的的所有部件都是相當(dāng)精密的,無論是對(duì)于檢測樣品還是流動(dòng)相的純度要求都高達(dá)99.99%,而不管是直接購買或是自己配置的溶劑都是無法達(dá)到這樣的純度,因此,在進(jìn)行試驗(yàn)之前必須對(duì)甲醇進(jìn)行過濾除雜,以防甲醇溶劑中的雜質(zhì)堵塞液相色譜儀的精密器件。
過濾甲醇的設(shè)備我們選用溶劑過濾器,溶劑過濾器由過濾杯、中間燒結(jié)濾頭、接收瓶、鋁合金夾子四部分構(gòu)成,具體操作方法如下:
1.將接收瓶放在水平桌面上,中間燒結(jié)濾頭從瓶口插入,取一張有機(jī)濾膜放在濾頭正上方,再將過濾杯覆蓋住有機(jī)濾膜,與濾頭對(duì)齊放好后,使用夾子固定好;
2.使用真空泵連接管將真空泵與溶劑過濾器連接好(由于有機(jī)濾膜的孔徑很小,此處真空泵的作用是加快過濾的速率);
3.使用燒杯取適量甲醇溶液,倒入少量溶劑到溶劑過濾器的過濾杯中,檢查中間燒結(jié)濾頭處是否漏液;
4.打開真空泵,直至過濾杯中的甲醇溶劑完全過去完成;
5.甲醇過濾完成后,拆開裝置,取出有機(jī)過濾膜清洗掉表層上的雜質(zhì),再進(jìn)行二次過濾即可。
流動(dòng)相脫氣的目的是去除溶劑中的氣泡,是必不可少的步驟,因?yàn)榱鲃?dòng)相中的氣泡進(jìn)入到液相色譜儀分析系統(tǒng)中,會(huì)影響系統(tǒng)的穩(wěn)定性,流動(dòng)相中的氣泡對(duì)液相色譜儀的影響有兩個(gè)方面:??氣泡隨溶劑進(jìn)入系統(tǒng)中,會(huì)使泵頭出現(xiàn)空轉(zhuǎn)打滑現(xiàn)象;??氣泡進(jìn)入檢測器中,經(jīng)紫外照射,響應(yīng)值不同,從而使基線不穩(wěn)。
我們主要采用超聲波清洗器去除流動(dòng)相溶劑中的氣泡,超聲清洗器的操作簡單快捷。只要將過濾后的溶劑放入盛有1/2~2/3體積水的超聲清洗器中震蕩半個(gè)小時(shí)即可。
在處理液相色譜儀流動(dòng)相的過程中要注意溶劑的二次感染,因此,要尤其注意使用容器和設(shè)備的清潔度,以及要注意流動(dòng)相溶劑的密封保存。
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