熒光定量PCR概述

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、**定量和定性分析。

圖1：熒光定量PCR擴(kuò)增曲線 

與RT-PCR相比，熒光定量PCR具有以下技術(shù)優(yōu)勢

1、實(shí)時(shí)監(jiān)測：通過擴(kuò)增曲線能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測PCR產(chǎn)物的積累。 2、特異性強(qiáng)：實(shí)驗(yàn)完成后，溶解曲線的分析可以驗(yàn)證擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性，降低假陽性。 3、**定量：利用擴(kuò)增進(jìn)入指數(shù)增長期的CT值來定量測定起始模板量，從而實(shí)現(xiàn)了極為**的核酸定量檢測。

圖2：熒光定量PCR溶解曲線

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容

送樣須知

1、技術(shù)服務(wù)咨詢：在您開始實(shí)驗(yàn)之前，本公司將為竭誠您提供最有效的熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)方案。 2、由于熒光定量PCR可以檢測任何類型樣本中基因的表達(dá)量，如組織、細(xì)胞、細(xì)菌等材料。因此本公司接受任何類型的樣本，對(duì)于不同的樣本需要的量有所不同，具體需要量請(qǐng)咨詢本公司，  3、不推薦提供RNA或cDNA樣品，除非您能充分證明所提供RNA/cDNA是高質(zhì)量的且可用于熒光定量PCR。 4、客戶提供盡可能詳細(xì)的背景信息；物種信息，擴(kuò)增目的基因的NCBI登錄號(hào)等。  5、客戶可以提供熒光定量PCR引物，如果沒有引物，本公司可以設(shè)計(jì)合成,但要另外收取費(fèi)用。  6、運(yùn)輸要求，液氮或干冰保存寄送，廣州本地客戶可上門收樣。注：樣本應(yīng)避免各類污染和反復(fù)凍融。

熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)服務(wù)報(bào)告內(nèi)容 

1、RNA濃度及熒光定量PCR原始數(shù)據(jù)及分析結(jié)果；       2、熒光定量PCR完整的實(shí)驗(yàn)步驟、使用儀器、軟件設(shè)置參數(shù)等。

質(zhì)量承諾

1、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，每個(gè)樣品至少三個(gè)平行對(duì)照，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 2、熒光定量PCR后，分析溶解曲線，保證產(chǎn)物的特異性。