同位素相對標(biāo)記與**定量技術(shù)（iTRAQ技術(shù)）

簡介：

? ? ? ?iTRAQ技術(shù)（同位素相對標(biāo)記與**定量技術(shù)）是 近年來**開發(fā)的一種新的蛋白質(zhì)組學(xué)定量研究技術(shù)。iTRAQ試劑盒包括八種同量的胺活性試劑，能對蛋白質(zhì)水解的肽段進(jìn)行標(biāo)記，因此采用串聯(lián)質(zhì)譜方法，可以對肽段進(jìn)行**的鑒別和定量。能夠得到：一般 500 至 600 種蛋白，以及不同樣品間蛋白質(zhì)表達(dá)的差異。?

應(yīng)用：

? 同時標(biāo)記 8 個樣品，一次實(shí)驗(yàn)實(shí)現(xiàn)多達(dá) 8 個樣品的蛋白質(zhì)鑒定和定量

? 非常高的通量

? 可以進(jìn)行多個時間點(diǎn)蛋白質(zhì)組動態(tài)變化的監(jiān)測，

? 可以分析詳細(xì)分期／型的臨床疾病樣本，并可設(shè)計(jì)樣本重復(fù)

? 甚至可以進(jìn)行個體樣本的研究

? 細(xì)胞周期、細(xì)胞信號傳導(dǎo)整個過程的蛋白質(zhì)組動態(tài)學(xué)

技術(shù)特點(diǎn)和優(yōu)勢

? 定量敏感、反應(yīng)速度快

? 標(biāo)記完全，標(biāo)記效率高達(dá) 97%以上

? 較高的重復(fù)性，能簡化譜的復(fù)雜程度、提高離子強(qiáng)度

? 可對多達(dá)八種不同樣本同時進(jìn)行定量分析

? 定性與定量同時進(jìn)行

?

實(shí)驗(yàn)大致流程：

? ? ? ?操作時首先是對不同蛋白質(zhì)樣品分別進(jìn)行酶解，并采用不同的標(biāo)記對酶解片段進(jìn)行標(biāo)記后混合，結(jié)合多維色譜分離和后續(xù)的串聯(lián)質(zhì)譜鑒定，從而實(shí)現(xiàn)對不同 來源樣品蛋白進(jìn)行分離和鑒定的目的，我們可以提供 8 重標(biāo)記 iTRAQ 標(biāo)記，可 以對多達(dá) 8 種不同樣本同時進(jìn)行定量分析。

原理：

? ? ? iTRAQ 試劑包含八種不同的胺活性試劑。每種胺活性試劑與水解后肽段結(jié) 合。胺活性試劑包含報(bào)告基團(tuán)和平衡基團(tuán)。

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