簡介
構(gòu)建穩(wěn)定細胞系的基本原理是將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上,載體被轉(zhuǎn)染到宿主細胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標(biāo)志進行篩選,最常用的真核表達載體的抗性篩選標(biāo)志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418來代替新霉素進行選擇性篩選,篩選得到可穩(wěn)定表達目的蛋白,或者穩(wěn)定表達沉默特定基因的細胞株。
服務(wù)內(nèi)容
1.載體構(gòu)建(客戶已可自備載體);
2.細胞培養(yǎng)與載體轉(zhuǎn)染;穩(wěn)定細胞株篩選;
3.實驗報告提交。
客戶提供
1.如客戶不能提供載體的,需提供載體構(gòu)建所需的相關(guān)信息,如載體類型,插入片段的序列信息等;
2.構(gòu)建穩(wěn)定細胞株所需細胞系的選擇;
3.與構(gòu)建穩(wěn)定細胞株相關(guān)的其他信息。
實驗報告內(nèi)容
1.本公司構(gòu)建載體的,提供載體及帶有載體的菌液各一份及相關(guān)的序列信息;
2.構(gòu)建成功的穩(wěn)定細胞株,轉(zhuǎn)染后需要檢測的,參考相關(guān)實驗服務(wù);
3.構(gòu)建穩(wěn)定細胞株實驗所需試劑耗材、儀器設(shè)備、實驗方法各一份;
4.其他與構(gòu)建穩(wěn)定細胞株相關(guān)的信息。