供應SILAC技術(shù)服務
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供應SILAC技術(shù)服務
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輝駿生物具有三年SILAC服務經(jīng)驗,顧客發(fā)表在權(quán)威期刊J.ProteomeRes.上的主體數(shù)據(jù)出自本公司,提供Arg和Lys的L、M、H三種同位素氨基酸。 一、SILAC概述SILAC即細胞培養(yǎng)條件下穩(wěn)定同位素標記技術(shù)(Stable isotope labeling with amino acids incellculture,SILAC),其基本原理是在細胞培養(yǎng)時,采用含有輕、中、重同位素型必需氨基酸的培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng),用于SILAC主要的穩(wěn)定同位素氨基酸是Lys和Arg,細胞在傳代培養(yǎng)過程中同位素氨基酸將被細胞用于合成蛋白質(zhì),細胞經(jīng)傳代培養(yǎng)5-6代后,細胞的所有蛋白質(zhì)將被同位素標記,等量混合標記的蛋白質(zhì)后經(jīng)過SDS-PAGE分離和質(zhì)譜分析,通過比較一級質(zhì)譜圖中三個同位素型肽段的面積大小進行相對定量,同時二級譜圖對肽段進行序列測定從而鑒定蛋白質(zhì)。由于SILAC標記技術(shù)是體內(nèi)標記技術(shù),幾乎不影響細胞的功能,同時靈敏度高,因此其在蛋白質(zhì)組學相關(guān)領域中得到了廣泛的應用,如比較蛋白質(zhì)組學,蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用,蛋白質(zhì)與DNA相互作用,蛋白質(zhì)與RNA相互作用等領域。二、與體外標記技術(shù)相比,SILAC屬于體內(nèi)標記,具有以下技術(shù)優(yōu)勢:1、高通量,可同時鑒定并定量數(shù)百至數(shù)千種蛋白質(zhì); 2、定量**,降低由于樣品制備不同而造成的實驗差異; 3、線性定量范圍廣;4、靈敏度更高,蛋白質(zhì)需要量明顯減少; 5、標記采用的是體內(nèi)標記技術(shù),更接近樣品真實狀態(tài)。三、SIALC技術(shù)服務流程四、SILAC技術(shù)服務內(nèi)容1、細胞同位素標記; 2、樣本制備與定量; 3、SDS-PAGE分離; 4、胰酶酶切后液相分離和質(zhì)譜分析;5、數(shù)據(jù)庫檢索;蛋白質(zhì)定量分析; 6、相關(guān)生物信息學分析; 7、實驗報告提交。 五、送樣須知1、技術(shù)咨詢:在您開始實驗之前,本公司將為您竭誠提供*有效的SILAC實驗設計方案,本公司提供Lys和Arg均為L、M、H標記的氨基酸。 2、為了保證SILAC實驗能順利進行,樣品寄送需滿足以下要求:基本要求:SILAC實驗僅適用于能在SILAC培養(yǎng)基中培養(yǎng)的材料,具體情形請咨詢本公司。運輸要求:液氮或干冰保存寄送,廣州本地客戶可上門收樣。 注:樣本應避免各類污染和反復凍融。六、實驗報告內(nèi)容 1、蛋白定鑒定和SILAC定量分析結(jié)果; 2、顧客指定蛋白質(zhì)對應的質(zhì)譜峰圖;3、SILAC實驗完整的實驗步驟、使用儀器、軟件檢索參數(shù)等。 七、SIALC技術(shù)服務案例八、服務周期及收費標準: 歡迎登陸: 服務熱線 400-699-1663十、質(zhì)量承諾1、嚴謹?shù)腟ILAC實驗設計方案確保定量分析結(jié)果可靠;2、提供客觀的SILAC實驗分析結(jié)果。
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