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輝駿生物已成功為各地科研單位服務超過3000張雙向凝膠電泳,數據已發(fā)表在權威專業(yè)雜志Proteomics. 上。一、DIGE概述 DIGE — 雙向熒光差異凝膠電泳(Two-dimensional fluorescencedifference gelelectrophoresis,2D-DIGE),是在傳統(tǒng)雙向電泳的基礎上發(fā)展而來的新型蛋白質組學定量技術,其分離蛋白質混合的原理與雙向電泳是一致的,主要利用蛋白質的等電點和分子量的差異來分離蛋白質混合物,同時應用熒光染料的靈敏度及內標的使用等技術,使其在定量蛋白質組學的研究中效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)雙向電泳。DIGE使用的熒光染料有Cy2,Cy3和Cy5,它們能與蛋白質的賴氨酸側鏈氨基反應而使蛋白質被標記,被標記蛋白質的等電點和分子量幾乎不受影響,等量混合標記好的蛋白質后進行雙向電泳,不同凝膠之間可以通過cy2內標匹配,消除凝膠之間的差異,蛋白質表達量的變化則通過cy3和cy5不同熒光的強度來體現。二、與常規(guī)雙向電泳后,銀染或考染膠相比,DIGE具有以下優(yōu)勢:1、靈敏度高,**可檢測到125pg的蛋白質; 2、高效性,同一塊凝膠上可以電泳兩個樣品,減輕了工作量;3、線性范圍更廣,動態(tài)范圍高達10-5; 4、定量**, 采用內標消除了凝膠與凝膠之間的實驗誤差,顯著提高了實驗的**度和可重復性;5、統(tǒng)計學分析,ImageMaster7.0(DIGE)軟件可以得到統(tǒng)計學可信的結果,降低了操作者之間的偏差。三、DIGE技術服務流程 四、DIGE技術服務內容 1、樣本制備與定量; 2、熒光標記; 3、雙向電泳和圖片分析; 4、DIGE實驗報告提交。五、送樣須知: 1、技術咨詢:在您開展實驗之前,本公司將為您竭誠提供*有效的DIGE實驗設計方案。2、為了保證DIGE實驗能順利進行,樣品須液氮或干冰保存寄送,廣州本地客戶可上門收樣。 注:樣本應避免各類污染和反復凍融。六、實驗報告內容 1、DIGE熒光電子圖片;2、蛋白質點定量分析結果,包括差異點號碼、差異倍數、pI和MW等; 3、完整實驗報告,包括實驗步驟、使用儀器、軟件檢索參數等。七、DIGE實驗案例DIGE定量分析結果。蛋白質樣品經過熒光染料標記后雙向電泳,ImageMaster7.0 (DIGE)分析差異點結果。八、服務周期及收費標準:歡迎登陸 服務熱線400-699-1663 九、質量承諾: 1、cy2作為內標,確保定量的準確;2、提供客觀的DIGE實驗分析結果。
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